实验原理如下:
1.重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接;
2.很多DNA聚合酶在进行PCR扩增时会在PCR产物双链DNA每条链的3分端加上一个突出的碱基A。pUCm- T载体 是一种已经线性化的载体,载体每条链的3分端带有一个突出的T。这样,pUCm- T载体的两端就可以和PCR产物的两端进行正确的AT配对,在连接酶的催化下,就可以把PCR产物连接到pUCm- T载体中,形成含有目的片断的重组载体。
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