硫酸铵分级沉淀蛋白质的原理和方法是什么啊

原理就是溶液中的离子强度不同时,不同蛋白质的溶解度不同,步骤就是不断加硫酸铵以血浆为例:加到盐浓度百分之二十到三十时纤维蛋白原沉淀,再加到浓度百分之五十时球蛋白沉淀,饱和时清蛋白沉淀。

1、基本原理:硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离,是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子,从而破坏蛋白质表面的水化膜,降低其溶解度,使之从溶液中沉淀出来。各种蛋白质的溶解度不同,因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。这种方法称之为盐析。盐浓度通常用饱和度来表示。硫酸铵因其溶解度大,温度系数小和不易使蛋白质变性而应用最广。

2、试剂及仪器:组织培养上清液、血清样品或腹水等,硫酸,饱和硫酸铵溶液,蒸馏水,PBS,透析袋,超速离心机,酸碱度计,磁力搅拌器。

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