1.什么是酶联免疫法
酶联免疫试剂的基本原理
酶联免疫试剂/测定法,简称酶联免疫法,或者ELISA法。
它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。
②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:
①固相的抗原或抗体
②酶标记的抗原或抗体
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
2.艾滋病试纸的胶体金法
胶体金法(金标)人类免疫缺陷病毒(HIV 1/2)抗体检测试剂盒是应用胶体金免疫层析技术制成的集灵敏性、特异性及操作简便的一步法HIV 1/2抗体定性检测试剂。用于定性检测人血清或血浆样本中的HIV 1型和HIV 2型的特异性抗体,以辅助诊断HIV感染,其阳性结果需用免疫印迹法确认。
其检测原理是用HIV重组抗原和羊抗鼠IgG分别固定于硝酸纤维素膜,并和包被有胶体金标记的HIV重组抗原及鼠IgG的玻璃纤维纸片及其他试剂组成。应用胶体金免疫层析技术,采用双抗原夹心的原理检测人类血清及血浆样本中的HIV 1/2抗体。